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相差是倒置顯微鏡最常用的觀察方法。該方法不要求標本染色，用于觀察活體細胞和微生物最為理想。相差成像技術提供了帶中性背景的明亮、高對比度、高分辨率的圖像。尼康采用了“切趾”相襯的新技術，減少了成像光暈，從而產生對比度優越、色調范圍更廣的圖像
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